王二妮，1985年生于陕西省榆林市榆阳区大河塔乡冯家湾村 。1997年进入榆林市百花艺术学校，学了两年戏曲舞蹈专业。
1999年，刚刚组建的安塞县艺术团到榆林招收演艺人才，王二妮成为安塞县艺术团的第一批成员 。
2001年初，王二妮代表安塞县去北京参加第一届农民歌手大赛并获得了第一名 。
2005年除夕，参加延安通往北京的“红色专列”首届春节联欢晚会。2006年，参加“陕西省第四届艺术节”并参加纪念建党85周年十大城市晚会。
2007年，参加全国建党86周年党的十七大歌舞晚会。同年，参加中央电视台《星光大道》节目，进入年度总决赛 ，宣布正式出道。
2008年，参与录制中央电视台CCTV-7综艺节目《乡村大世界》，节目中客串第二现场主持人；9月26日，中央电视台模仿秀节目《梦想剧场》节目组破例为王二妮做了个人专场 。
2009年，演唱国庆献礼历史电视剧《东方红》片尾曲《山丹丹开花红艳艳》；9月，演唱音乐人冯晓泉改编版《东方红》试听版 。
2010年1月12日，推出个人第一张专辑《爱陕北》，这张专辑共收入《东方红》、《走西口》等12首传统经典陕北民歌，以新的音乐元素，表现了陕北民歌悠远辽阔的艺术意境，呈现了陕北民歌的原生态风格 。2月11日，参加第一届北京新春音乐会 。
2011年10月7日，CCTV-3音乐类季播节目《巅峰音乐汇》王二妮专场开演，这是王二妮首次在央视的个人演唱会 。同年，参演民族歌剧《白毛女》，扮演喜儿一角 。
2012年，应邀参加第二界中国孙思邈中医药文化节，演唱歌曲《山丹丹开花红艳艳》 。11月30日，在北京昌平一个山区农村拍摄歌曲《大辫子》MV 。
2013年1月5日，王二妮加入北京歌剧舞剧院；1月18日，受邀参加中组部的“茶话会”节目录制 ；9月18日，受邀在新加坡举办了“艺满中秋”个人首场音乐会 ；9月28日、29日参加名家荟萃演出《京韵华彩》 。
2014年1月，主演剧情电影《哭恋》在中国上映 ；在2014年央视马年春晚搭档阿宝演唱歌曲《张灯结彩》 ；7月21日，携专辑首发单曲《故乡》参加央视访谈节目《艺术人生》暑期特别节目——《时间都去哪儿了》的录制 ；11月，参与录制中央三台非常6+1特别节目《非常星发布》 。
2016年2月，登上中央电视台“春节联欢晚会”的舞台，搭档贠恩凤、王向荣演唱《山丹丹开花红艳艳》 ；6月16日，推出单曲《三妮儿的笑》 ；9月15日，在西安大唐芙蓉园参加中央电视台中秋晚会；10月，推出单曲《妈妈教我信天游》 ；10月1日，参加中央电视台《江山如画——2016国庆交响音乐会》 ；11月30日，作为民族歌唱家的代表参加在北京人民大会堂开幕的中国文学艺术界联合会第十次全国代表大会、中国作家协会第九次全国代表大会，并成为中国文联第十届全国文联委员会委员中的两位监票员之一，并在文代会代表联欢晚会中同郭兰英、张也一起登台献唱 。
2017年1月12日，推出单曲《吉祥中国年》和《过年的味道》 ；2月11日，登上中央电视台元宵晚会与杜朋朋、正月十五组合、蜜蜂少女队等共同演唱开场歌舞《正月十五闹花灯》 ；5月11日，推出个人EP专辑《丰收中国》，专辑以原生态民乐为底蕴，加入各种新颖独特的编曲而且运用了多种风格的民乐 ；6月，作为特邀嘉宾助阵《魅力中国城》红色魅力城市延安竟演 。9月3日，参与录制《中国戏歌》，演唱《五哥放羊》 ；9月15日，参与拍摄并主演红色主旋律电视剧《奔向延安》，饰演角色柳二妮 ；9月22日，录制央视综艺频道《巅峰音乐汇》王二妮个人专场音乐会 ；9月28日-10月10日，王二妮和王小妮随国务院侨办“文化中国”一行来到美国，分别在波士顿、纽约、华盛顿、圣保罗、辛辛那提五个城市，为当地侨胞奉献了六场演出 ；10月15日，随中国文联前往德国参加中德建交45周年“莱茵华韵”文艺晚会 ；11月1日，推出两首单曲《在延安》和《荞麦花》[44-45] 。
2018年1月，参加“百花迎春”中国文学艺术界春节大联欢，演唱开场曲《恭贺新禧》 。2月8日，推出贺岁单曲《新年到》 。7月，参加中国文联文艺志愿服务团“送欢乐下基层”走进甘肃陇南武都区慰问演出系列活动 。12月23日，参加“为人民歌唱——中国乐派声乐大师郭兰英艺术成就音乐会”，演唱歌曲《南泥湾》 。同月，参加“我们的四十年——庆祝改革开放40周年文艺晚会”，和杜朋朋、高保利共同演唱歌曲《信天游》 。
2019年1月17日，参加“百花迎春——中国文学艺术界春节大联欢” 。1月25日，参加中央电视台新春走基层赴江苏省丹阳市慰问演出活动，演唱歌曲《桃花红杏花白》 。
2020年10月25日，参加中央广播电视总台重阳节特别节目《岁岁又重阳》 。
2021年7月1日，参加的庆祝中国共产党成立100周年文艺演出《伟大征程》播出，演唱歌曲《小康之歌》。
王二妮从人民中来，质朴是她的人格底色，她的音乐与人民同在，为人民歌唱，用来源于人民的音乐回馈人民。她扎根于中华文化沃土，民族性是她音乐的灵魂。她个性鲜明地演唱“中国风”的音乐，彰显民族特色和民族风格。（新华网、凤凰音乐综合评 、 ）
